第203章 孙教授：打不过能加入吗？(2/2)
休息时间结束。
就在这时，许久未见的孙长明教授来串门了。
陈浩语气真诚地发问：“既然是要解决蛋白污染和降解的问题，为什么一定要用蛋白酶k去水浴消化一个小时，还要花那么高成本去买离心柱反复洗脱呢？”
浓度：138 ng/ul。a260/280：192。
他引以为傲、耗时四小时、加了各种昂贵试剂才跑出的175。
有没有什么优雅的投靠姿势？在线等，挺急的。
轻轻的他走了，正如他轻轻的来，挥一挥衣袖，不带走一丝云彩~
测量！
江河默默地剥开一个橘子，把目光偏向窗外，看天。
“没什么可是的，科研需要的是严谨，你们用这种糙办法，跑出来的数据全都是假阳性或者直接假阴性。”
a260/280：195。
陈浩理所当然地回答：“双重氯仿抽提，加糖原共沉淀啊，我们老大提出来的这个方法，牺牲点第一次的上清液体积，再加一次氯仿离心，蛋白就全沉下去了，然后补5微升糖原把rna析出来，整个流程下来四十分钟就搞定了，效果很好呀，为什么要搞得像你那么复杂？”
“嗯……数据还算凑合吧，不过，不同组织的样本特性不一样，你们这套方法在血清上管用，在我们消化道黏液样本上，未必适用，科研嘛，就是要在不同的方向上多做尝试，加油吧。”
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“王教授，样本沉淀物很小，洗涤的时候，枪头最好贴着管壁对侧下去。”
孙长明沉默半天，最后也客气的笑道：
呃啊，难受啊！
陈浩道：“孙教授，数据是不是真的，测一下就知道了。”
“哎呀，想起来了，我培养箱里的那些细胞还没换液呢，今天就不跟你们多聊了，走了啊。”
第三管。
极其稳定的高纯度，完美的数据重现性，没有任何悬念的绝对碾压。
孙长明嘿嘿一笑：“老杨啊，其实我今天过来是想说，我们研究所那边，消化道肿瘤的rna提取纯化，刚刚取得了重大突破。”
王晓晴觉得杨煦有点厉害了，稍有些崇拜。
孙长明皱了皱眉：“怎么？没听懂？也是，这套酶解过柱的体系确实复杂了点，你们刚接触湿实验，慢慢来……”
孙长明愣了一下：“不用这些，你怎么去蛋白？怎么提纯？”
“对的对的。”
陈浩在旁边补了一刀：“孙教授，你看，四十分钟提出来的，效果是不是比你那个好多了？”
出门。
……
195是什么鬼啊！
他说完，便朝门口走去。
杨煦绷不住了，哈哈大笑：“老孙啊，你那个蛋白酶k水浴一小时的方法，确实挺有创意的，就是费时费力还费钱，没关系，坚持你的想法，相信你一定行！”
蔡卓群立刻上前，打开离心机盖，加入无酶水，溶解。
实验重新运转。
蔡卓群依言换了第二个样本。
“哦哦，抱歉，习惯性盯紧细节。”
离心机跑的新一批内容出来了。
杨煦冷漠：“挺好的，不劳孙教授费心。”
嗯……现在还来得及吗？
1微升的样本滴入基座。
杨煦在她旁边轻声提醒，美其名曰指导：
王晓晴好奇道：“噢？说来听听。”
他今日看着心情不错，背着手，春风得意的。
就在这时，很巧嗷。
175的纯度，在08年，确实值得骄傲。
浓度：145 ng/ul。
孙长明：“啊？”
18到20是rna纯度的完美区间。
此话一出，实验室里的众人都抬起了头。
浓度：151 ng/ul。a260/280：196。
“杨主任，你挡着我光了。”
“我知道。”
孙长明伸手捂住胸口，喘不上气。
杨煦心里乐开了花，脸上云淡风轻。
nanodrop分光光度计前。
“你说。”孙长明点点头。
屏幕刷新，一排数据跳了出来。
“不是，孙教授。”陈浩默默地举起了手，“我有个问题。”
大家面面相觑，好像不知道该说什么好。
“妈的，这小子到底怎么想出来的？这哪来的方法？我什么时候能跟他一起做实验？”
孙长明坐直了身体，开始长篇大论：
a260/230：203。
杨煦脸上的笑容一下就消失了，道：“来看看项目进度，你来干什么？”
要不把项目组解散算了，打不过就加入吧？
孙长明一边扶着墙往研究所走，一边在嘴里反复念叨着这几个词。
“可是……”蔡卓群在旁边忍不住插嘴。
目光扫过全场，看见杨煦也在，笑意更深：“老杨也在啊？怎么，今天医院不忙啊？”
孙长明：“？”
王教授不都加入学生团队了吗，我就不行？
说完，孙长明往椅背上一靠，端起桌上的水杯喝了一口，等待着惊叹声。
孙教授试图依赖江河。
“最重要的就是放弃传统的trizol，我们采用了硅胶膜离心柱法结合多重酶解，首先，在裂解阶段加入高浓度的蛋白酶k，56度水浴消化一个小时，然后，利用离心柱进行过柱，为了洗掉多糖杂质，我们专门配制了一种含高浓度盐酸胍和异丙醇的洗脱液，反复洗脱三次。”
孙长明，不嘻嘻。
接下来的环节是沉淀后的无水乙醇洗涤。
他转过头，看了江河一眼，挑了挑眉毛。
“5微升，5g/l的糖原，糖原作为共沉淀剂，不影响下游的pcr扩增，还能让微量的rna在管底形成肉眼可见的沉淀团块，我说的对吧？”
可这个呢？
“虽然这个流程耗时要四个多小时，成本也高，但纯度那是没得说，a260/280的比值，我们稳定做到了175以上！这在当前的液体活检领域，绝对是领先水平！”
然而，实验室里众人的表情都怪怪的。
“我？我是来分享学术经验的。”
“换一管，再测。”孙长明不信邪。
“哎哟，都在忙呢？”
孙长明：“大家都知道，消化液和血清里的rna极其容易降解，我们团队花了一个月的时间，反复调整试剂配比，终于摸索出了一套极限纯化的办法。”
“双重氯仿……糖原……”
王晓晴准备亲自操作移液枪。
孙长明悠然道：“你们还在搞rna提取？设备用得还习惯不？”
——想装就装吧，谁让你是我老师呢。
反应了半天后，孙长明抗拒道：“不对，氯仿确实能去蛋白，但你抽提两次，水相里的rna早就流失得七七八八了，就算加了糖原，浓度也绝对达不到下游要求，纯度就更别提了，能过15都算你们运气好。”
“吸的时候慢一点，拇指控制好二挡的回弹力度。”